鬼筆環肽-AMCA標記（藍色）

產品描述

鬼筆環肽-AMCA能特異性結合F-肌動蛋白。在納摩爾濃度下使用該衍生物時，對甲醛固定且透化的組織切片、細胞培養物或無細胞實驗體系中的F-肌動蛋白進行標記、鑒定和定量分析。與肌動蛋白單體相比，鬼筆環肽與肌動蛋白絲的結合親和力更強，能顯著降低肌動蛋白亞基從纖維末端解離的速率常數，從而通過抑制纖維解聚作用實現肌動蛋白絲的穩定化。研究還發現，該物質可抑制F-肌動蛋白的ATP水解活性。

鬼筆環肽在細胞中的功能表現具有濃度依賴性：低濃度作用于細胞質時，能將低聚合態的胞質肌動蛋白與細絲蛋白募集形成穩定的肌動蛋白聚合物"島"，但不會影響應力纖維（即微絲粗束）的結構。利用熒光標記的鬼筆環肽的衍生物對肌動蛋白絲進行染色，可成為研究細胞內F-肌動蛋白分布的有效手段。鬼筆環肽熒光衍生物不僅能精確定位活細胞/固定細胞中的肌動蛋白絲，還可實現體外單根肌動蛋白絲的可視化觀測，現已成為高分辨率研究肌動蛋白網絡的重要工具。

本產品具有高特異性結合的特點，選擇性結合F-肌動蛋白（纖維狀肌動蛋白），幾乎不與G-肌動蛋白（單體肌動蛋白）結合，能清晰顯示細胞骨架的精細結構，低背景干擾 ，成像清晰。適用樣品類型：僅用于固定細胞。固定和透化細胞、細胞培養、無細胞實驗、甲醛固定和透化組織切片。

訂購信息

運輸與保存

藍冰運輸。-20℃避光保存，有效期12個月。

技術資料

使用方法

樣品分析方案概述：

1.       將樣本置于微孔板孔中。

2.       吸棄孔內液體。

3.       每孔加入100 μL鬼筆環肽-AMCA標記液。

4.       室溫避光孵育20–90min。

5.       清洗細胞去除未結合染料。

6.       使用DAPI濾光片進行熒光顯微鏡觀察。

6.【注】：將小瓶加熱至室溫并在打開前短暫離心。

儲存條件

1.       -20℃避光保存可穩定至少6個月，避免反復凍融。

2.       鬼筆環肽具毒性（半數致死量LD50=2 mg/kg），雖單管含量極低（僅對蚊蟲可能致命），需謹慎操作。

工作溶液配置

鬼筆環肽-AMCA標記工作溶液

1.       取1 µL鬼筆環肽-AMCA標記原液加入1 mL含1% BSA的PBS緩沖液中混勻。

1.【注】：1. 鬼筆環肽標記原液需分裝后-20℃避光保存。

1.          2. 不同細胞類型染色效果可能存在差異，建議根據實際情況調整工作液濃度。

樣本實驗操作流程

細胞染色

1.       使用3.0-4.0%甲醛PBS溶液室溫固定細胞10-30min。【注】：避免使用含甲醇固定劑，甲醇會破壞肌動蛋白結構。推薦使用無甲醇甲醛固定劑。

2.       PBS緩沖液洗滌固定后細胞2-3次。【可選】：為提高通透性，可加入0.1% Triton X-100 PBS溶液處理3-5min，之后用PBS洗滌2-3次。

3.       向96孔板每孔加入100 μL鬼筆環肽-AMCA工作液，室溫避光染色20-90min。

4.       用PBS輕柔洗滌2-3次去除多余標記物，封片后使用DAPI濾光片組進行熒光顯微鏡觀察。

注意事項

1.     本產品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。

2.     產品外觀形態：液體（濃度1mg/ml），鬼筆環肽系列產品有固體和液體兩種，液體為DMSO溶解后的產品，不需要再溶解。

相關產品推薦

1X PBS (無菌)（貨號：AC08L011）

EZ Trans細胞轉染試劑（高效）（貨號：AC04L092）