從機制到落地：EAE小鼠模型如何撐起多發性硬化癥研究半邊天？

在自身免疫疾病研究領域，實驗性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）模型始終占據著不可替代的核心位置。作為人類多發性硬化癥（MS）的經典動物模型，EAE不僅幫助科研人員揭開了中樞神經系統免疫損傷的神秘面紗，更為新藥研發提供了關鍵的臨床前實驗支撐。今天，我們就結合行業成熟完整的生物技術服務方——雛田生物的標準化實踐，拆解EAE模型從造模到應用的完整鏈路。

為什么EAE是MS研究的“金標準”？

多發性硬化癥的發病機制復雜，人體研究受倫理和樣本限制難以深入，而EAE模型高度復現了MS的核心病理特征：機體免疫系統錯誤識別中樞神經髓鞘為外來抗原并發動攻擊，引發炎癥浸潤、脫髓鞘病變，最終導致運動功能障礙。通過EAE模型，研究者可以動態觀察疾病進展、驗證靶點有效性、評估候選藥物療效，是連接基礎研究與臨床轉化的關鍵橋梁。

標準化造模：每一步都決定成敗

EAE模型構建對操作規范性要求嚴苛，雛田生物經過大量實踐驗證，形成了一套穩定可復制的流程：

1. 選對“主角”：實驗動物篩選

選用8–10周齡雄性C57BL/6小鼠：該品系背景清晰，對EAE易感性高，能穩定模擬發病過程；選擇發育成熟、免疫系統穩定的成年個體，可有效降低實驗誤差，保障結果一致性。

2. 試劑精準配制

• 百日咳毒素（PTX）：50μg PTX溶于0.5ml純水配制成100ng/μl儲備液，4℃保存，臨用前用無菌PBS稀釋至1ng/μl，現用現配；

• CFA：將100mg結核分枝桿菌加入20ml IFA，配制成5mg/ml工作液，4℃保存，使用前充分混勻；

• MOG????多肽：10mg MOG????溶于4ml無菌PBS，配制成2.5mg/ml溶液，-20℃保存，通常現用現配。

3. 核心步驟：乳化與免疫

按1:1體積比將MOG溶液逐滴加至CFA中，通過高速剪切乳化至油包水狀態，這是模型成功的關鍵——乳化不充分會直接導致免疫原性下降。隨后進行兩次PTX尾靜脈注射（造模當天和48小時后各一次，每次100μl 1ng/μl PTX溶液），增強血腦屏障通透性，促進免疫細胞浸潤中樞神經。

4. 規范操作：麻醉與注射

腹腔注射180–200μl 0.8%實驗動物腹腔麻醉制劑麻醉小鼠，確認麻醉生效后，在大腿根部皮下兩側各注射100μl MOG-CFA乳化劑，完成免疫誘導。

模型驗證：多維度評估確?？煽啃?/span>

造模完成后，需要通過三重評估確認模型質量：

• 臨床評分：采用Kono’s 5分法量化癥狀：0分無癥狀，1分尾巴無力，2分單側后肢癱瘓，3分雙側后肢癱瘓，4分四肢均受累，5分為死亡，評分≥1分即判定為造模成功；

• 組織學驗證：取中樞神經組織進行HE染色，觀察炎癥細胞浸潤、脫髓鞘等典型病理改變；

• 分子檢測：通過qPCR、ELISA等技術檢測促炎細胞因子表達水平，從分子層面確認免疫激活狀態。

雛田生物：EAE模型服務的“全鏈條保障”

作為專注疾病模型構建的服務商，雛田生物在EAE領域形成了三大核心優勢：

? 高度定制化：覆蓋小分子藥物、XDC偶聯藥物、細胞治療等多場景需求，可基于CRISPR基因編輯技術構建特定基因修飾的EAE模型，適配First-in-Class藥物研發的個性化需求；

? 技術平臺硬核：搭載先進探針技術實現造模過程可視化，自有高標準細胞庫保障模型質量穩定性，IVIS小動物活體成像系統支持連續高通量監測疾病動態變化；

? 管理規范透明：全流程數據可追溯，采用鷹谷電子實驗記錄本加密保護客戶知識產權，SPF級動物房符合倫理要求，兼顧動物福利與實驗合規性。

未來展望：從模型到療法的跨越

隨著單細胞測序、空間組學等技術的發展，EAE模型的研究邊界正在不斷拓展——從傳統的病理表型觀察，深入到細胞亞群異質性、神經-免疫互作機制等深層領域。雛田生物也將持續迭代模型構建技術，為科研團隊提供更精準的工具支撐，助力多發性硬化癥等自身免疫疾病的診療突破。