肌苷的分析 參考《中國(guó)藥典》（2025年版）二部

肌苷是由次黃嘌呤與核糖結(jié)合而成的核苷類化合物，臨床應(yīng)用廣泛，可適用于各種原因引起的白細(xì)胞減少癥、急性及慢性肝炎或肝硬化、各種心臟疾患等。

按照《中國(guó)藥典》（2025年版）二部肌苷項(xiàng)目中有關(guān)物質(zhì)和含量測(cè)定項(xiàng)下方法，篩選色譜柱進(jìn)行測(cè)試。

考慮到該方法流動(dòng)相條件為5%甲醇，因此選用耐100%水相的CAPCELL PAK C18 AQ和DAISOPAK SP-ODS-BP色譜柱進(jìn)行分析。

在藥典條件下，2支色譜柱均能滿足藥典要求，肌苷峰與鳥苷峰分離度均在3以上，且理論塔板數(shù)均在10,000以上。

有關(guān)物質(zhì)

按照有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)下分析條件，使用CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色譜柱分析結(jié)果如圖1、圖2所示。

系統(tǒng)適用性溶液中，肌苷保留時(shí)間為14.08 min，與鳥苷峰分離度4.02，能夠滿足藥典不低于3.0要求，理論塔板數(shù)11,040，滿足藥典不低于3,000要求，不對(duì)稱因子1.10，峰型良好。

圖1  系統(tǒng)適用性溶液分析譜圖

圖上所示數(shù)字為分離度、理論塔板數(shù)

表1  各峰積分結(jié)果表

圖2  供試品分析結(jié)果

【色譜條件】

色譜柱：CP C18 AQ S5; 4.6×250 mm

流動(dòng)相：甲醇 / 水 = 5 / 95

流速：1.0 mL/min

柱溫：25 ℃

檢測(cè)：UV 248 nm

進(jìn)樣量：10 μL

系統(tǒng)適用性溶液：按照藥典方法配置，次黃嘌呤0.5 µg/mL、鳥苷1.5 µg/mL、肌苷0.5 mg/mL （水溶）

供試品：0.5 mg/mL （水溶）

含量測(cè)定

按照含量測(cè)定項(xiàng)下方法，同樣能夠獲得良好分析結(jié)果，結(jié)果如圖3所示，肌苷峰形良好，不對(duì)稱因子為1.02。

圖3  含量測(cè)定分析結(jié)果

【色譜條件】

色譜柱：CP C18 AQ S5; 4.6×250 mm

流動(dòng)相：甲醇 / 水 = 5 / 95

流速：1.0 mL/min

柱溫：25 ℃

檢測(cè)：UV 248 nm

進(jìn)樣量：10 μL

供試品：20 μg/mL （水溶）

有關(guān)物質(zhì)

按照有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)下分析條件，使用DAISOPAK SP-120-5-ODS-BP S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色譜柱分析結(jié)果如圖4、圖5所示。

系統(tǒng)適用性溶液中，肌苷保留時(shí)間為15.78 min，與鳥苷峰分離度3.98，能夠滿足藥典不低于3.0要求，理論塔板數(shù)13,328，滿足藥典不低于3000要求，不對(duì)稱因子1.11，峰型良好。

圖4  系統(tǒng)適用性溶液分析結(jié)果

圖上所示數(shù)字為分離度、理論塔板數(shù)

表2 積分表

圖5  供試品分析結(jié)果

【色譜條件】

色譜柱：DP SP-ODS-BP S5; 4.6×250 mm

流動(dòng)相：甲醇 / 水 = 5 / 95

流速：1.0 mL/min

柱溫：25 ℃

檢測(cè)：UV 248 nm

進(jìn)樣量：10 μL

系統(tǒng)適用性溶液：按照藥典方法配置，次黃嘌呤0.5 µg/mL、鳥苷1.5 µg/mL、肌苷0.5 mg/mL （水溶）

供試品：0.5 mg/mL （水溶）

含量測(cè)定

按照含量測(cè)定項(xiàng)下方法，同樣能夠獲得良好分析結(jié)果，結(jié)果如圖6所示，肌苷峰形良好，不對(duì)稱因子為1.10。

圖6  含量測(cè)定分析結(jié)果

【色譜條件】

色譜柱：DP SP-ODS-BP S5; 4.6×250 mm

流動(dòng)相：甲醇 / 水 = 5 / 95

流速：1.0 mL/min

柱溫：25 ℃

檢測(cè)：UV 248 nm

進(jìn)樣量：10 μL

供試品：20 μg/mL （水溶）

綜上所述，按照《中國(guó)藥典》（2025年版）二部肌苷項(xiàng)目中有關(guān)物質(zhì)和含量測(cè)定項(xiàng)下方法，使用耐100%水相的CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6 mm i.d.×250 mm和DAISOPAK SP-120-5-ODS-BP S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色譜柱，能夠獲得良好檢測(cè)結(jié)果。